牛奶是最古老的天然飲料之一,被譽為“白色血液”,對人體的重要性可想而知。而組成人體蛋白質的氨基酸有20種,其中有8種是人體本身不能合成的(嬰兒為9種,比成人多的是組氨酸),這些氨基酸稱為必需氨基酸。我們進食的蛋白質中如果包含了所有的必需氨基酸,這種蛋白質便叫作全蛋白。牛奶中的蛋白質便是全蛋白。
今天,我們通過實驗介紹純牛奶及酸奶的蛋白質測定方法。
1.實驗部分
1.1儀器
N310自動凱氏定氮儀(格丹納)
DS-360-42H高溫石墨消解儀(格丹納)
1.2試劑與耗材 鹽酸或硫酸溶液:c(H + )= 0 . 1mol /L ,標準滴定液。
硼酸溶液:質量分數 2% 。
氫氧化鈉溶液:質量分數 40% 。
溴甲酚綠 - 甲基紅混合指示劑:將溴甲酚綠乙醇溶液 (1g/ L) 與甲基紅乙醇溶液(1g/ L) 按 5 : 1 體積比臨時混合搖勻備用。
實驗中涉及到的試劑,均為優級純或分析純;
實驗用水為無氨蒸餾水。
催化劑片: 3g 硫酸鉀和 0. 2g 硫酸銅混合均勻壓片
1.3實驗過程
1.3.1取樣 準確稱量2-3g 的樣品(精確至0.1mg ),加催化劑一片(或硫酸鉀5g 與硫酸銅0.5g) ,再沿瓶壁滴加硫酸 8.5mL。
1.3.2石墨消解 利用DS-360-42H高溫石墨消解儀進行消解,將消解管放在石墨爐上,蓋上排氣罩,連接廢氣吸收系統,設定消解溫度參數如下表:
消解完,取下消解管并冷卻。
1.3.3上機測試 待消解管內溶液冷卻至室溫后,將消解管放置于N310自動凱氏定氮儀上,開始蒸餾滴定。定氮儀設置程序如下:
1.3.4儀器自動滴定并給出計算結果。
2.結果與討論
采用多孔石墨消解儀可以快速大批量對樣品進行消解,比電熱板消解速度跟效率都要大大提高,回收率也得到保障,使用凱氏定氮儀測試奶制品中蛋白質含量,結果準確,平行性良好。